出血性大腸桿菌O157：H7為革蘭氏陰性桿菌，需氧或兼性，有周鞭毛，并有菌毛，不產生芽孢的桿菌。發酵乳糖，不發酵或遲緩發酵山梨醇。氧化酶陰性。MUG陰性。從分離培養平板上挑取可疑菌苔接種于每種微量生化管內。將已接種的生化管套上無菌塑料帽，直立于三折吸塑短架內，于35－37℃培養箱中培養，結果觀察見表1。注意：如有特殊的接種方式或培養時間，請詳見每種生化管附帶的使用說明。

表1

產品名稱	結果判定		培養時間（小時）	使用說明
產品名稱	陽性	陰性
山梨醇	黃色	紫色	8－24
纖維二糖
棉子糖
蛋白胨水	紅色	不變色	24	培養后加靛基質試劑2－3滴，立即觀察結果。
西蒙氏枸櫞酸鹽	藍色	不變色	24－48	用接種針挑取新鮮菌苔在斜面上劃“之”字形接種，豎立培育。
鳥、賴氨酸脫羧酶	試驗管藍綠色，對照管變黃	試驗管與對照管均變黃	18－24	每株被檢菌應同時接種氨基酸對照管一支，并加滅菌液體石蠟5-8滴覆蓋培養基表面。培養18－24小時，未見陽性結果，繼續培養4天，再做終結果判定。
半固體瓊脂	擴散生長	無擴散生長	24—48	用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種，豎立培育。
三糖鐵瓊脂	產酸變黃色，產硫化氫變黑色	不變色	24	用接種針挑取新鮮菌苔穿刺，穿刺完畢后在斜面上劃“之”字形接種，豎立培育。
葡萄糖磷酸鹽胨水	MR：紅色	不變色	96	培養后加MR試劑2－3滴，立即觀察結果。
葡萄糖磷酸鹽胨水	VP：紅色	不變色	48	培養后依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液，混勻，再培養10－20分鐘觀察結果。

試驗項目	結果判定
山梨醇	陰性或遲緩
纖維二糖	陰性
棉子糖	陽性
蛋白胨水	陽性
西蒙氏枸櫞酸鹽	陰性
鳥氨酸脫羧酶	陽性
賴氨酸脫羧酶	陽性
半固體瓊脂	有動力或無動力
三糖鐵瓊脂	底及斜面呈黃色H₂S陰性
葡萄糖磷酸鹽胨水	MR 陽性 VP 陰性

備注：本鑒定盒是按照產品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。

（三）出血性大腸桿菌O157：H7的和生化鑒定特征（見表2）

表2 大腸桿菌O157：H7的生化特征

試驗項目	結果判定
山梨醇	陰性或遲緩
纖維二糖	陰性
棉子糖	陽性
蛋白胨水	陽性
西蒙氏枸櫞酸鹽	陰性
鳥氨酸脫羧酶	陽性
賴氨酸脫羧酶	陽性
半固體瓊脂	有動力或無動力
三糖鐵瓊脂	底及斜面呈黃色H₂S陰性
葡萄糖磷酸鹽胨水	MR 陽性 VP 陰性

注：“+” 陽性； “—” 陰性；“＋/－” 陽性或陰性

凡用于上述方法在被檢食品中分離獲得的純菌落，經用抗E.coli O157：H7標準血清或EHEC O157：H7。乳膠凝集試劑測試，呈陽性結果即可報告為該食品試樣中檢出腸出血性大腸桿菌O157：H7。

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